মাইক্রোস্কোপ রেজোলিউশন সূত্র। মাইক্রোস্কোপ ম্যাগনিফিকেশন। মাইক্রোস্কোপ রেজোলিউশন

একটি মাইক্রোস্কোপ একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাসের তুলনায় বৃহত্তর বিবর্ধন এবং বৃহত্তর রেজোলিউশন সহ ছোট বস্তুগুলি পর্যবেক্ষণ করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে। একটি মাইক্রোস্কোপের অপটিক্যাল সিস্টেম দুটি অংশ নিয়ে গঠিত: একটি লেন্স এবং একটি আইপিস। মাইক্রোস্কোপ লেন্স আইপিসের সামনের ফোকাল প্লেনে বস্তুর একটি সত্যিকারের বিবর্ধিত বিপরীত চিত্র তৈরি করে। আইপিস একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাসের মতো কাজ করে এবং সেরা দেখার দূরত্বে একটি ভার্চুয়াল চিত্র তৈরি করে। সমগ্র অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সাথে সম্পর্কিত, প্রশ্নবিদ্ধ বস্তুটি সামনের ফোকাল সমতলে অবস্থিত।

মাইক্রোস্কোপ ম্যাগনিফিকেশন

একটি মাইক্রোলেনের ক্রিয়া তার রৈখিক বিবর্ধন দ্বারা চিহ্নিত করা হয়: V ob = -Δ/F\" ob * F\" ob - মাইক্রোলেনের ফোকাল দৈর্ঘ্য * Δ - লেন্সের পিছনের ফোকাস এবং সামনের ফোকাসের মধ্যে দূরত্ব। আইপিস, যাকে অপটিক্যাল ব্যবধান বা টিউবের অপটিক্যাল দৈর্ঘ্য বলা হয়।

আইপিসের সামনের ফোকাল প্লেনে মাইক্রোস্কোপের উদ্দেশ্য দ্বারা তৈরি চিত্রটি আইপিসের মাধ্যমে দেখা হয়, যা দৃশ্যমান বিবর্ধন সহ একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাস হিসাবে কাজ করে:

G ঠিক আছে =¼ F ঠিক আছে

একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের সামগ্রিক বিবর্ধন বস্তুনিষ্ঠ বিবর্ধন এবং আইপিস বিবর্ধনের গুণফল হিসাবে নির্ধারিত হয়: G=V সম্পর্কে *G প্রায়

যদি পুরো মাইক্রোস্কোপের ফোকাল দৈর্ঘ্য জানা যায়, তবে এর আপাত বিবর্ধনটি ম্যাগনিফাইং গ্লাসের মতো একইভাবে নির্ধারণ করা যেতে পারে:

একটি নিয়ম হিসাবে, আধুনিক অণুবীক্ষণ যন্ত্রের লেন্সের বিবর্ধন মানসম্মত এবং সংখ্যার একটি সিরিজের পরিমাণ: 10, 20, 40, 60, 90, 100 বার। আইপিস ম্যাগনিফিকেশনেরও খুব নির্দিষ্ট মান রয়েছে, উদাহরণস্বরূপ 10, 20, 30 বার। সমস্ত আধুনিক অণুবীক্ষণ যন্ত্রের উদ্দেশ্য এবং আইপিসগুলির একটি সেট রয়েছে যেগুলিকে একত্রে ফিট করার জন্য বিশেষভাবে ডিজাইন করা এবং তৈরি করা হয়েছে যাতে সেগুলিকে বিভিন্ন বিবর্ধন অর্জনের জন্য একত্রিত করা যায়।

মাইক্রোস্কোপের দৃশ্যের ক্ষেত্র

মাইক্রোস্কোপের দেখার ক্ষেত্র আইপিসের কৌণিক ক্ষেত্রের উপর নির্ভর করে ω , যার মধ্যে মোটামুটি ভাল মানের একটি চিত্র পাওয়া যায়: 2y=500*tg(ω)/G * G - মাইক্রোস্কোপ ম্যাগনিফিকেশন

আইপিসের একটি প্রদত্ত কৌণিক ক্ষেত্রের জন্য, বস্তুর স্থানে অনুবীক্ষণ যন্ত্রের রৈখিক ক্ষেত্রটি ছোট, এর আপাত বিবর্ধন তত বেশি।

মাইক্রোস্কোপ প্রস্থান ছাত্র ব্যাস

একটি মাইক্রোস্কোপের প্রস্থান ছাত্র ব্যাস নিম্নরূপ গণনা করা হয়:
যেখানে A হল মাইক্রোস্কোপের সামনের ছিদ্র।

একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের প্রস্থান পিউপিলের ব্যাস সাধারণত চোখের পুতুলের ব্যাসের (0.5 - 1 মিমি) থেকে সামান্য ছোট হয়।

একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের মাধ্যমে পর্যবেক্ষণ করার সময়, চোখের পুতুলটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের বহির্গমন পিউপিলের সাথে সারিবদ্ধ হওয়া আবশ্যক।

মাইক্রোস্কোপ রেজোলিউশন

একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের অন্যতম গুরুত্বপূর্ণ বৈশিষ্ট্য হল এর রেজুলেশন। অ্যাবের বিচ্ছুরণ তত্ত্ব অনুসারে, একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের রৈখিক রেজোলিউশন সীমা, অর্থাৎ, একটি বস্তুর বিন্দুর মধ্যে ন্যূনতম দূরত্ব যা পৃথক হিসাবে চিত্রিত করা হয়, তা নির্ভর করে অণুবীক্ষণ যন্ত্রের তরঙ্গদৈর্ঘ্য এবং সংখ্যাসূচক অ্যাপারচারের উপর:
একটি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের সর্বাধিক অর্জনযোগ্য রেজোলিউশন মাইক্রোস্কোপের অ্যাপারচারের অভিব্যক্তির উপর ভিত্তি করে গণনা করা যেতে পারে। যদি আমরা বিবেচনা করি যে কোণের সাইনের সর্বোচ্চ সম্ভাব্য মান হল একতা, তাহলে গড় তরঙ্গদৈর্ঘ্যের জন্য আমরা মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন গণনা করতে পারি:

একটি মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন বাড়ানোর দুটি উপায় রয়েছে: * বস্তুনিষ্ঠ অ্যাপারচার বাড়িয়ে, * আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য হ্রাস করে।

নিমজ্জন

লেন্সের অ্যাপারচার বাড়ানোর জন্য, প্রশ্নে থাকা বস্তু এবং লেন্সের মধ্যবর্তী স্থান তথাকথিত নিমজ্জন তরল দিয়ে পূর্ণ হয় - একটি স্বচ্ছ পদার্থ যার প্রতিসরণ সূচক একের বেশি। জল, সিডার তেল, গ্লিসারিন দ্রবণ এবং অন্যান্য পদার্থ যেমন একটি তরল হিসাবে ব্যবহৃত হয়। উচ্চ-বিবর্ধন নিমজ্জন উদ্দেশ্যগুলির অ্যাপারচারগুলি মান পর্যন্ত পৌঁছায়, তাহলে একটি নিমজ্জন অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপের সর্বাধিক অর্জনযোগ্য রেজোলিউশন হবে।

অতিবেগুনী রশ্মির প্রয়োগ

একটি মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন বাড়ানোর জন্য, দ্বিতীয় পদ্ধতিটি অতিবেগুনী রশ্মি ব্যবহার করে, যার তরঙ্গদৈর্ঘ্য দৃশ্যমান রশ্মির চেয়ে ছোট। এই ক্ষেত্রে, বিশেষ অপটিক্স ব্যবহার করা আবশ্যক যেগুলি অতিবেগুনী আলো থেকে স্বচ্ছ। যেহেতু মানুষের চোখ অতিবেগুনি রশ্মি বুঝতে পারে না, তাই হয় অদৃশ্য অতিবেগুনি মূর্তিটিকে দৃশ্যমান ছবিতে রূপান্তরিত করার উপায় অবলম্বন করা বা অতিবেগুনি রশ্মিতে ছবিটি তোলার প্রয়োজন। তরঙ্গদৈর্ঘ্যে, মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন হবে।

বর্ধিত রেজোলিউশন ছাড়াও, অতিবেগুনী আলো পর্যবেক্ষণ পদ্ধতির অন্যান্য সুবিধা রয়েছে। সাধারণত, জীবন্ত বস্তু বর্ণালীর দৃশ্যমান অঞ্চলে স্বচ্ছ, এবং তাই পর্যবেক্ষণের আগে প্রাক-দাগযুক্ত। কিন্তু কিছু বস্তুর (নিউক্লিক অ্যাসিড, প্রোটিন) বর্ণালীর অতিবেগুনী অঞ্চলে নির্বাচনী শোষণ রয়েছে, যার কারণে তারা দাগ ছাড়াই অতিবেগুনী আলোতে "দৃশ্যমান" হতে পারে।

2. মাইক্রোস্কোপের অপটিক্যাল সিস্টেম।

3. মাইক্রোস্কোপ ম্যাগনিফিকেশন।

4. রেজোলিউশন সীমা। মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন শক্তি।

5. দরকারী মাইক্রোস্কোপ বিবর্ধন.

6. মাইক্রোস্কোপির বিশেষ কৌশল।

7. মৌলিক ধারণা এবং সূত্র।

8. কাজ।

একটি বস্তুর ছোট বিবরণ পার্থক্য করার জন্য চোখের ক্ষমতা রেটিনা বা দৃশ্যের কোণের উপর চিত্রের আকারের উপর নির্ভর করে। দৃষ্টিকোণ বাড়ানোর জন্য, বিশেষ অপটিক্যাল ডিভাইস ব্যবহার করা হয়।

25.1। ম্যাগনিফায়ার

দৃষ্টিকোণ বাড়ানোর জন্য সবচেয়ে সহজ অপটিক্যাল ডিভাইস হল একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাস, যা একটি ছোট-ফোকাস কনভারজিং লেন্স (f = 1-10 সেমি)।

প্রশ্নবিদ্ধ বস্তুটি ম্যাগনিফাইং গ্লাস এবং এর সামনের মধ্যে স্থাপন করা হয়েছে ফোকাসএমনভাবে যাতে এর ভার্চুয়াল চিত্রটি প্রদত্ত চোখের জন্য থাকার সীমার মধ্যে থাকে। সাধারণত দূরে বা কাছাকাছি বাসস্থানের প্লেন ব্যবহার করা হয়। পরবর্তী কেসটি বাঞ্ছনীয়, যেহেতু চোখ ক্লান্ত হয় না (ক্যানুকার পেশী টান হয় না)।

আসুন দেখার কোণগুলি তুলনা করি যেখানে "নগ্নভাবে" দেখা হলে একটি বস্তু দৃশ্যমান হয় স্বাভাবিকচোখ এবং একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাস দিয়ে। একটি বস্তুর একটি ভার্চুয়াল ইমেজ অসীম (বাসস্থানের দূর সীমা) এ প্রাপ্ত হলে আমরা কেসের জন্য গণনা করব।

খালি চোখে একটি বস্তু দেখার সময় (চিত্র 25.1, a), সর্বাধিক দৃষ্টিকোণ পেতে, বস্তুটিকে সর্বোত্তম দৃষ্টি a 0 এর দূরত্বে স্থাপন করতে হবে। দেখার কোণ যেখান থেকে বস্তুটিকে দেখা যায় সেটি β = B/a 0 এর সমান (B হল বস্তুর আকার)।

ম্যাগনিফাইং গ্লাস (চিত্র 25.1, b) দিয়ে একটি বস্তু দেখার সময়, এটি ম্যাগনিফাইং গ্লাসের সামনের ফোকাল প্লেনে স্থাপন করা হয়। এই ক্ষেত্রে, চোখ একটি অসীম দূরবর্তী সমতলে অবস্থিত B বস্তুর একটি কাল্পনিক চিত্র দেখতে পায়। যে কোণে ছবিটি দৃশ্যমান তা β" ≈ B/f এর সমান।

ভাত। 25.1।দেখার কোণ: ক- খালি চোখে; খ- একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাস ব্যবহার করে: f - ম্যাগনিফাইং গ্লাসের ফোকাল দৈর্ঘ্য; N - চোখের নোডাল বিন্দু

বিবর্ধক কাচ- দেখার অনুপাতের কোণβ", যার অধীনে আপনি একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাসে একটি বস্তুর চিত্র দেখতে পারেন, দেখার কোণেβ, যার অধীনে একটি বস্তু সর্বোত্তম দৃষ্টির দূরত্ব থেকে "নগ্ন" স্বাভাবিক চোখে দৃশ্যমান:

অদূরদর্শী এবং দূরদৃষ্টিসম্পন্ন চোখের জন্য ম্যাগনিফিকেশন ম্যাগনিফিকেশন ভিন্ন, কারণ তাদের সর্বোত্তম দৃষ্টিভঙ্গির বিভিন্ন দূরত্ব রয়েছে।

দূরের বাসস্থানের সমতলে একটি চিত্র তৈরি করার সময় দূরদৃষ্টি বা দূরদৃষ্টিসম্পন্ন চোখের দ্বারা ব্যবহৃত একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাস দ্বারা প্রদত্ত বিবর্ধনের সূত্রটি নির্ণয় ছাড়াই উপস্থাপন করা যাক:

যেখানে একটি দূরত্ব বাসস্থানের সুদূর সীমা।

সূত্র (25.1) পরামর্শ দেয় যে ম্যাগনিফাইং গ্লাসের ফোকাল দৈর্ঘ্য হ্রাস করে, আপনি একটি নির্বিচারে বড় ম্যাগনিফিকেশন অর্জন করতে পারেন। নীতিগতভাবে এটি সত্য। যাইহোক, যখন একটি বিবর্ধক কাচের ফোকাল দৈর্ঘ্য হ্রাস করা হয় এবং এর আকার একই থাকে, তখন বিকৃতি ঘটে যা বিবর্ধনের সম্পূর্ণ প্রভাবকে অস্বীকার করে। অতএব, একক-লেন্স ম্যাগনিফায়ারে সাধারণত 5-7x ম্যাগনিফিকেশন থাকে।

বিপর্যয় কমাতে, জটিল ম্যাগনিফাইং চশমা তৈরি করা হয়, দুটি বা তিনটি লেন্স সমন্বিত। এই ক্ষেত্রে, এটি 50-গুণ বৃদ্ধি অর্জন করা সম্ভব।

25.2। মাইক্রোস্কোপ অপটিক্যাল সিস্টেম

অন্য লেন্স বা লেন্স সিস্টেম দ্বারা তৈরি একটি বস্তুর প্রকৃত চিত্র একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাস দিয়ে দেখার মাধ্যমে বৃহত্তর বিবর্ধন অর্জন করা যেতে পারে। এই ধরনের একটি অপটিক্যাল ডিভাইস একটি মাইক্রোস্কোপ প্রয়োগ করা হয়। এক্ষেত্রে ম্যাগনিফাইং গ্লাস বলা হয় আইপিস,এবং অন্যান্য লেন্স - লেন্সএকটি মাইক্রোস্কোপে রশ্মির পথ চিত্রে দেখানো হয়েছে। 25.2।

অবজেক্ট B এমনভাবে লেন্সের সামনের ফোকাসের (এফ সম্পর্কে) কাছে এমনভাবে স্থাপন করা হয়েছে যে এর প্রকৃত, বিবর্ধিত চিত্র B" আইপিস এবং এর সামনের ফোকাসের মধ্যে অবস্থিত।

ভাত। 25.2।একটি মাইক্রোস্কোপে রশ্মির পথ।

এই ক্ষেত্রে, আইপিস একটি কাল্পনিক বিবর্ধিত চিত্র দেয় B", যা চোখ দ্বারা দেখা হয়।

বস্তু এবং লেন্সের মধ্যে দূরত্ব পরিবর্তন করে, আমরা নিশ্চিত করি যে B" ছবিটি চোখের দূরত্বের সমতলে রয়েছে (এই ক্ষেত্রে চোখ ক্লান্ত হয় না)। স্বাভাবিক দৃষ্টিসম্পন্ন ব্যক্তির জন্য B" হল আইপিসের ফোকাল সমতলে অবস্থিত, এবং বি" অসীমে প্রাপ্ত হয়।

25.3। মাইক্রোস্কোপ ম্যাগনিফিকেশন

একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের প্রধান বৈশিষ্ট্য হল এর কৌণিক বৃদ্ধি.এই ধারণাটি একটি ম্যাগনিফাইং গ্লাসের কৌণিক বিবর্ধনের অনুরূপ।

মাইক্রোস্কোপ ম্যাগনিফিকেশন- দেখার অনুপাতের কোণβ", যার অধীনে আপনি বস্তুর চিত্র দেখতে পারেন আইপিস,দৃষ্টিকোণ থেকেβ, যার অধীনে বস্তুটি সর্বোত্তম দৃষ্টির দূরত্ব থেকে "খালি" চোখে দৃশ্যমান হয় (a 0):

25.4। রেজোলিউশন সীমা। মাইক্রোস্কোপ রেজোলিউশন

আপনি ধারণা পেতে পারেন যে টিউবের অপটিক্যাল দৈর্ঘ্য বৃদ্ধি করে, আপনি একটি নির্বিচারে বড় আকারের বিবর্ধন অর্জন করতে পারেন এবং তাই, একটি বস্তুর ক্ষুদ্রতম বিবরণ পরীক্ষা করতে পারেন।

যাইহোক, আলোর তরঙ্গ বৈশিষ্ট্যগুলিকে বিবেচনায় নিলে দেখা যায় যে মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে বোঝা যায় ছোট বিবরণের আকারের সাথে সম্পর্কিত বিধিনিষেধ সাপেক্ষে বিবর্তনআলো লেন্স খোলার মধ্য দিয়ে যাচ্ছে। বিবর্তনের কারণে, একটি আলোকিত বিন্দুর চিত্র একটি বিন্দু নয়, কিন্তু ছোট হালকা বৃত্ত।যদি বিবেচনাধীন বস্তুর অংশ (বিন্দু) যথেষ্ট দূরে অবস্থিত হয়, তাহলে লেন্স দুটি পৃথক বৃত্তের আকারে তাদের ছবি দেবে এবং তাদের আলাদা করা যাবে (চিত্র 25.3, ক)। পার্থক্যযোগ্য বিন্দুর মধ্যে ক্ষুদ্রতম দূরত্ব বৃত্তের "স্পর্শ" এর সাথে মিলে যায় (চিত্র 25.3, b)। যদি পয়েন্টগুলি খুব কাছাকাছি অবস্থিত হয়, তাহলে সংশ্লিষ্ট "চেনাশোনাগুলি" ওভারল্যাপ হয় এবং একটি বস্তু হিসাবে অনুভূত হয় (চিত্র 25.3, c)।

ভাত। 25.3।রেজোলিউশন

এই বিষয়ে অণুবীক্ষণ যন্ত্রের ক্ষমতা দেখানোর প্রধান বৈশিষ্ট্য রেজোলিউশন সীমা।

রেজোলিউশন সীমাঅণুবীক্ষণ যন্ত্র (জেড) - একটি বস্তুর দুটি বিন্দুর মধ্যে ক্ষুদ্রতম দূরত্ব যেখানে তারা পৃথক বস্তু হিসাবে আলাদা করা যায় (অর্থাৎ একটি মাইক্রোস্কোপে দুটি বিন্দু হিসাবে অনুভূত)।

রেজোলিউশন সীমার পারস্পরিক বলা হয় রেজোলিউশনরেজোলিউশনের সীমা যত কম, রেজোলিউশন তত বেশি।

একটি মাইক্রোস্কোপের তাত্ত্বিক রেজোলিউশন সীমা আলোকসজ্জার জন্য ব্যবহৃত আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উপর নির্ভর করে এবং কৌণিক ছিদ্রলেন্স

কৌণিক অ্যাপারচার(উ) - একটি বস্তু থেকে উদ্দেশ্যমূলক লেন্সে প্রবেশকারী আলোক রশ্মির চরম রশ্মির মধ্যবর্তী কোণ।

আসুন আমরা বায়ুতে মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন সীমার সূত্রটি নির্ণয় ছাড়াই নির্দেশ করি:

কোথায় λ - আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য যা বস্তুকে আলোকিত করে।

আধুনিক অণুবীক্ষণ যন্ত্রের কৌণিক অ্যাপারচার 140° পর্যন্ত থাকে। যদি আমরা গ্রহণ করি λ = 0.555 µm, তারপর আমরা রেজোলিউশন সীমা Z = 0.3 µm মানটি পাই।

25.5। দরকারী মাইক্রোস্কোপ বিবর্ধন

আসুন জেনে নেওয়া যাক এর লেন্সের একটি প্রদত্ত রেজোলিউশন সীমার জন্য মাইক্রোস্কোপের বিবর্ধন কত বড় হওয়া উচিত। আসুন আমরা বিবেচনা করি যে চোখের নিজস্ব রেজোলিউশন সীমা রয়েছে, যা রেটিনার গঠন দ্বারা নির্ধারিত হয়। লেকচার 24 এ আমরা নিম্নলিখিত অনুমানটি পেয়েছি চোখের রেজোলিউশন সীমা: ZGL = 145-290 µm। একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্র দ্বারা পৃথক করা একই বিন্দুগুলিকে আলাদা করতে চোখের জন্য, বিবর্ধন প্রয়োজন।

এই বৃদ্ধি বলা হয় দরকারী বৃদ্ধি।

নোট করুন যে একটি মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে একটি বস্তুর সূত্রে (25.4) ছবি তোলার সময়, Z GL-এর পরিবর্তে, ফিল্ম রেজোলিউশন সীমা Z PL ব্যবহার করা উচিত।

দরকারী মাইক্রোস্কোপ বিবর্ধন- ম্যাগনিফিকেশন যেখানে মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন সীমার সমান আকারের একটি বস্তুর একটি চিত্র রয়েছে যার আকার চোখের রেজোলিউশন সীমার সমান।

মাইক্রোস্কোপ Z m ≈0.3 µm এর রেজোলিউশন সীমার জন্য উপরে প্রাপ্ত অনুমান ব্যবহার করে, আমরা দেখতে পাই: G p ~500-1000।

অণুবীক্ষণ যন্ত্রের জন্য উচ্চতর পরিবর্ধনের মান অর্জনের কোন মানে হয় না, যেহেতু কোন অতিরিক্ত বিবরণ যাইহোক দৃশ্যমান হবে না।

দরকারী মাইক্রোস্কোপ বিবর্ধন - এটি অণুবীক্ষণ যন্ত্র এবং চোখ উভয়ের সমাধান ক্ষমতার একটি যুক্তিসঙ্গত সমন্বয়।

25.6। বিশেষ মাইক্রোস্কোপি কৌশল

বিশেষ মাইক্রোস্কোপি কৌশল অণুবীক্ষণ যন্ত্রের মীমাংসা ক্ষমতা (রেজোলিউশন সীমা হ্রাস) বাড়ানোর জন্য ব্যবহার করা হয়।

1. নিমজ্জন।কিছু অণুবীক্ষণ যন্ত্রে কমাতে রেজোলিউশন সীমালেন্স এবং বস্তুর মধ্যবর্তী স্থানটি একটি বিশেষ তরল দিয়ে পূর্ণ হয় - নিমজ্জনএই মাইক্রোস্কোপ বলা হয় নিমজ্জননিমজ্জনের প্রভাব হল তরঙ্গদৈর্ঘ্য কমানো: λ = λ 0 /n, কোথায় λ 0 - একটি ভ্যাকুয়ামে আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্য, এবং n হল নিমজ্জনের প্রতিসরণকারী সূচক। এই ক্ষেত্রে, মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন সীমা নিম্নলিখিত সূত্র দ্বারা নির্ধারিত হয় (সূত্রের সাধারণীকরণ (25.3)):

উল্লেখ্য যে নিমজ্জন মাইক্রোস্কোপের জন্য বিশেষ লেন্স তৈরি করা হয়, যেহেতু লেন্সের ফোকাল দৈর্ঘ্য একটি তরল মাধ্যমে পরিবর্তিত হয়।

2. UV মাইক্রোস্কোপি।কমার জন্য রেজোলিউশন সীমাতারা শর্ট-ওয়েভ অতিবেগুনী বিকিরণ ব্যবহার করে, চোখের অদৃশ্য। অতিবেগুনী অণুবীক্ষণ যন্ত্রে, অতিবেগুনী রশ্মিতে একটি মাইক্রোবজেক্ট পরীক্ষা করা হয় (এই ক্ষেত্রে, লেন্সগুলি কোয়ার্টজ গ্লাস দিয়ে তৈরি এবং নিবন্ধন ফটোগ্রাফিক ফিল্ম বা একটি বিশেষ ফ্লুরোসেন্ট স্ক্রিনে করা হয়)।

3. মাইক্রোস্কোপিক বস্তুর আকার পরিমাপ।একটি মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে, আপনি পর্যবেক্ষণ করা বস্তুর আকার নির্ধারণ করতে পারেন। এর জন্য একটি আইপিস মাইক্রোমিটার ব্যবহার করা হয়। সবচেয়ে সহজ আইপিস মাইক্রোমিটার হল একটি বৃত্তাকার কাচের প্লেট যার উপর একটি স্নাতক স্কেল প্রয়োগ করা হয়। লেন্স থেকে প্রাপ্ত চিত্রের সমতলে মাইক্রোমিটার ইনস্টল করা হয়। আইপিসের মাধ্যমে দেখা হলে, বস্তুর চিত্র এবং স্কেল একত্রিত হয় এবং আপনি গণনা করতে পারেন যে স্কেলে কোন দূরত্ব পরিমাপ করা মানের সাথে মিলে যায়। অকুলার মাইক্রোমিটারের বিভাজন মূল্য প্রাথমিকভাবে একটি পরিচিত বস্তু থেকে নির্ধারিত হয়।

4. মাইক্রোপ্রজেকশন এবং মাইক্রোফটোগ্রাফি।একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্র ব্যবহার করে, আপনি শুধুমাত্র একটি আইপিসের মাধ্যমে একটি বস্তুকে পর্যবেক্ষণ করতে পারবেন না, তবে এটি ফটোগ্রাফ বা পর্দায় প্রজেক্ট করতে পারবেন। এই ক্ষেত্রে, বিশেষ আইপিস ব্যবহার করা হয়, যা মধ্যবর্তী চিত্র A"B" ফিল্ম বা পর্দায় প্রজেক্ট করে।

5. আল্ট্রামাইক্রোস্কোপি।মাইক্রোস্কোপ কণা সনাক্ত করতে পারে যার আকার তার রেজোলিউশনের বাইরে থাকে। এই পদ্ধতিটি তির্যক আলোকসজ্জা ব্যবহার করে, যার কারণে মাইক্রোকণাগুলি অন্ধকার পটভূমিতে হালকা বিন্দু হিসাবে দৃশ্যমান হয়, যখন কণাগুলির গঠন দেখা যায় না, তাদের উপস্থিতির সত্যটি কেবল প্রতিষ্ঠিত করা যায়।

তত্ত্বটি দেখায় যে, অণুবীক্ষণ যন্ত্রটি যত শক্তিশালীই হোক না কেন, 3 মাইক্রনের চেয়ে ছোট যেকোন বস্তুকে কোন বিবরণ ছাড়াই কেবল একটি বিন্দু হিসাবে উপস্থাপন করা হবে। কিন্তু এর মানে এই নয় যে এই ধরনের কণা দেখা যায় না, তাদের গতিবিধি পর্যবেক্ষণ করা যায়, বা গণনা করা যায় না।

যেসব কণার আকার মাইক্রোস্কোপের রেজুলেশন সীমার চেয়ে ছোট তা পর্যবেক্ষণ করতে একটি যন্ত্র বলা হয় আল্ট্রামাইক্রোস্কোপআল্ট্রামাইক্রোস্কোপের প্রধান অংশ একটি শক্তিশালী আলোক যন্ত্র; এইভাবে আলোকিত কণাগুলি একটি সাধারণ মাইক্রোস্কোপে পর্যবেক্ষণ করা হয়। আল্ট্রামাইক্রোস্কোপি এই সত্যের উপর ভিত্তি করে যে তরল বা গ্যাসে ঝুলে থাকা ছোট কণাগুলি শক্তিশালী পার্শ্বীয় আলোকসজ্জার অধীনে দৃশ্যমান হয় (একটি সূর্যকিরণে দৃশ্যমান ধূলিকণার কথা চিন্তা করুন)।

25.8। মৌলিক ধারণা এবং সূত্র

টেবিলের শেষ

25.8। কাজ

1. 0.8 সেমি ফোকাল দৈর্ঘ্যের একটি লেন্স একটি মাইক্রোস্কোপের উদ্দেশ্য হিসাবে ব্যবহৃত হয় যার আইপিস ফোকাল দৈর্ঘ্য 2 সেমি। টিউবের অপটিক্যাল দৈর্ঘ্য 18 সেমি। মাইক্রোস্কোপের বিবর্ধন কী?

2. একটি কৌণিক অ্যাপারচার u = 140 o সহ শুষ্ক এবং নিমজ্জন (n = 1.55) লেন্সগুলির রেজোলিউশন সীমা নির্ধারণ করুন। তরঙ্গদৈর্ঘ্য 0.555 µm ধরুন।

3. তরঙ্গদৈর্ঘ্যের রেজোলিউশন সীমা কত? λ = 0.555 µm, যদি সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার হয়: A 1 = 0.25, A 2 = 0.65?

4. একটি কমলা ফিল্টার (তরঙ্গদৈর্ঘ্য 600 এনএম) এর মাধ্যমে পর্যবেক্ষণ করার সময় একটি মাইক্রোস্কোপে 0.25 μm ব্যাস সহ একটি উপকোষীয় উপাদান দেখতে একটি নিমজ্জন তরল কোন প্রতিসরণ সূচক ব্যবহার করা উচিত? মাইক্রোস্কোপের অ্যাপারচার কোণ 70°।

5. ম্যাগনিফাইং গ্লাসের রিমে একটি শিলালিপি "x10" আছে। এই ম্যাগনিফাইং গ্লাসের ফোকাল দৈর্ঘ্য নির্ধারণ করুন।

6. মাইক্রোস্কোপ লেন্স ফোকাল দৈর্ঘ্য f 1 = 0.3 সেমি, টিউবের দৈর্ঘ্য Δ = 15 সেমি, বিবর্ধন Г = 2500। আইপিসের ফোকাল দৈর্ঘ্য F 2 খুঁজুন। সর্বোত্তম দৃষ্টি দূরত্ব একটি 0 = 25 সেমি।

সিস্টেম সম্প্রসারণ- একটি গুরুত্বপূর্ণ ফ্যাক্টর, যা প্রয়োজনীয় সমস্যার সমাধানের উপর নির্ভর করে এক বা অন্য মাইক্রোস্কোপের পছন্দের উপর ভিত্তি করে। আমরা সবাই এই সত্যে অভ্যস্ত যে এটি একটি পরিদর্শন মাইক্রোস্কোপে 1000x বা তার বেশি পরিবর্ধনের সাথে অর্ধপরিবাহী উপাদানগুলি পরিদর্শন করা প্রয়োজন, আমরা 50x স্টেরিও মাইক্রোস্কোপ দিয়ে কাজ করে কীটপতঙ্গগুলি অধ্যয়ন করতে পারি এবং আমরা পেঁয়াজের আঁশ অধ্যয়ন করেছি, আয়োডিন দিয়ে দাগযুক্ত বা উজ্জ্বল। সবুজ, একটি মনোকুলার মাইক্রোস্কোপে স্কুলে, যখন বিবর্ধনের ধারণাটি এখনও আমাদের কাছে পরিচিত ছিল না।

কিন্তু যখন আমাদের সামনে একটি ডিজিটাল বা কনফোকাল মাইক্রোস্কোপ থাকে এবং লেন্সগুলির মান 2000x, 5000x থাকে তখন কীভাবে বিবর্ধনের ধারণাটি ব্যাখ্যা করা যায়? এর মানে কি, একটি অপটিক্যাল মাইক্রোস্কোপে 1000x ম্যাগনিফিকেশন কি 1000x ডিজিটাল মাইক্রোস্কোপের মতো একটি চিত্র তৈরি করবে? আপনি এই নিবন্ধে এই সম্পর্কে শিখতে হবে.

অপটিক্যাল জুম সিস্টেম

যখন আমরা একটি পরীক্ষাগার বা স্টেরিওস্কোপিক মাইক্রোস্কোপ দিয়ে কাজ করি, তখন সিস্টেমের বর্তমান বিবর্ধন গণনা করা কঠিন নয়। সিস্টেমের সমস্ত অপটিক্যাল উপাদানগুলির বিবর্ধনকে গুন করা প্রয়োজন। সাধারণত, একটি স্টেরিও মাইক্রোস্কোপের ক্ষেত্রে, এর মধ্যে একটি উদ্দেশ্যমূলক লেন্স, একটি জুম লেন্স বা ম্যাগনিফাইং ড্রাম এবং আইপিস অন্তর্ভুক্ত থাকে।
একটি প্রচলিত পরীক্ষাগার মাইক্রোস্কোপের ক্ষেত্রে, পরিস্থিতি আরও সহজ - সিস্টেমের মোট বিবর্ধন = আইপিসগুলির বিবর্ধন কার্যকারী অবস্থানে ইনস্টল করা লেন্সের বিবর্ধন দ্বারা গুণিত। এটি মনে রাখা গুরুত্বপূর্ণ যে কখনও কখনও মাইক্রোস্কোপ টিউবগুলির নির্দিষ্ট মডেল রয়েছে যেগুলির একটি বিবর্ধন বা হ্রাস ফ্যাক্টর রয়েছে (বিশেষত লিটজ মাইক্রোস্কোপের পুরানো মডেলগুলির সাথে সাধারণ)। এছাড়াও, অতিরিক্ত অপটিক্যাল উপাদান, এটি একটি স্টেরিও মাইক্রোস্কোপে একটি সমাক্ষীয় আলোকসজ্জার উত্স হোক বা টিউবের নীচে অবস্থিত একটি মধ্যবর্তী ক্যামেরা অ্যাডাপ্টার, একটি অতিরিক্ত বিবর্ধন ফ্যাক্টর থাকতে পারে।

অতিরিক্ত অপটিক্যাল উপাদানের মাঝে মাঝে 1 ব্যতীত তাদের নিজস্ব ম্যাগনিফিকেশন ফ্যাক্টর থাকে। এই ক্ষেত্রে, অলিম্পাস SZX16 স্টেরিওমাইক্রোস্কোপের কোঅক্সিয়াল ইলুমিনেটর (আইটেম 2) এর একটি অতিরিক্ত ম্যাগনিফিকেশন ফ্যাক্টর রয়েছে 1.5x।

উদাহরণস্বরূপ, 10x আইপিস সহ একটি স্টেরিও মাইক্রোস্কোপ, একটি 2x উদ্দেশ্য, 8x এ একটি জুম লেন্স এবং 1.5x ফ্যাক্টর সহ একটি সমাক্ষীয় আলোকসজ্জা ইউনিটের মোট অপটিক্যাল ম্যাগনিফিকেশন 10x2x8x1.5 = 240x হবে।

একটি হালকা মাইক্রোস্কোপ ব্যবহার করে চিত্র অধিগ্রহণের পরিকল্পিত চিত্র। আইপিস লেন্স দ্বারা নির্মিত চিত্রটিকে বড় করে এবং একটি ভার্চুয়াল চিত্র তৈরি করে।

এই ক্ষেত্রে, অপটিক্যাল ম্যাগনিফিকেশন (G) কে অপটিক্যাল সিস্টেম থেকে ইমেজ স্পেসে উত্থিত রশ্মির প্রবণতার কোণের স্পর্শকের অনুপাত হিসাবে বোঝা উচিত রশ্মির কোণের স্পর্শকের সাথে এটির স্থানটিতে সংযুক্ত বস্তু অথবা অপটিক্যাল সিস্টেমের দ্বারা গঠিত সেগমেন্টের চিত্রের দৈর্ঘ্যের অনুপাত, অপটিক্যাল সিস্টেমের অক্ষের সাথে লম্ব, সেগমেন্টের দৈর্ঘ্যের সাথে

জ্যামিতিক সিস্টেম ম্যাগনিফিকেশন

সেই ক্ষেত্রে যখন সিস্টেমে আইপিস নেই, এবং বর্ধিত চিত্রটি একটি মনিটরের পর্দায় একটি ক্যামেরা দ্বারা গঠিত হয়, উদাহরণস্বরূপ, একটি মাইক্রোস্কোপের মতো, একজনকে অপটিক্যাল সিস্টেমের জ্যামিতিক বিবর্ধন শব্দটিতে যেতে হবে।
একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের জ্যামিতিক বিবর্ধন হল মনিটরে থাকা বস্তুর চিত্রের রৈখিক আকারের সাথে অধ্যয়ন করা বস্তুর প্রকৃত আকারের অনুপাত।
আপনি নিম্নলিখিত মানগুলিকে গুণ করে জ্যামিতিক বিবর্ধন মান পেতে পারেন: লেন্সের অপটিক্যাল ম্যাগনিফিকেশন, ক্যামেরা অ্যাডাপ্টারের অপটিক্যাল ম্যাগনিফিকেশন, ক্যামেরা ম্যাট্রিক্সের তির্যক থেকে মনিটরের তির্যক অনুপাত।
উদাহরণস্বরূপ, যখন একটি 50x উদ্দেশ্য, একটি 0.5x ক্যামেরা অ্যাডাপ্টার, একটি 1/2.5" ক্যামেরা এবং একটি 14" ল্যাপটপ মনিটরে চিত্রটি প্রদর্শন করে একটি পরীক্ষাগার মাইক্রোস্কোপে কাজ করার সময়, আমরা একটি জ্যামিতিক সিস্টেম ম্যাগনিফিকেশন = 50x0.5x(14) পাব /0.4) = 875x।
যদিও 10x আইপিসের ক্ষেত্রে অপটিক্যাল ম্যাগনিফিকেশন 500x এর সমান হবে।

ডিজিটাল মাইক্রোস্কোপ, কনফোকাল প্রোফিলোমিটার, ইলেক্ট্রন মাইক্রোস্কোপ এবং অন্যান্য সিস্টেম যা মনিটরের পর্দায় একটি বস্তুর ডিজিটাল চিত্র তৈরি করে জ্যামিতিক বিবর্ধনের ধারণার সাথে কাজ করে। এই ধারণাটি অপটিক্যাল জুমের সাথে বিভ্রান্ত হওয়া উচিত নয়।

মাইক্রোস্কোপ রেজোলিউশন

একটি বিস্তৃত ভুল ধারণা রয়েছে যে একটি মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন এবং এর ম্যাগনিফিকেশন শক্তভাবে যুক্ত - যত বেশি ম্যাগনিফিকেশন হবে, আমরা এর মাধ্যমে ছোট বস্তু দেখতে পাব। এটা সত্য নয়। সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ ফ্যাক্টর সবসময় অনুমতিঅপটিক্যাল সিস্টেম। সর্বোপরি, একটি অমীমাংসিত চিত্রকে বড় করা আমাদের এটি সম্পর্কে নতুন তথ্য দেবে না।

অণুবীক্ষণ যন্ত্রের রেজোলিউশন অবজেক্টিভ অ্যাপারচারের সাংখ্যিক মানের উপর, সেইসাথে আলোকসজ্জার উৎসের তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উপর নির্ভর করে। আপনি দেখতে পাচ্ছেন, এই সূত্রে কোনো সিস্টেম বৃদ্ধির পরামিতি নেই।

যেখানে λ হল আলোর উৎসের গড় তরঙ্গদৈর্ঘ্য, NA হল লেন্সের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার, R হল অপটিক্যাল সিস্টেমের রেজোলিউশন।

হ্যালোজেন উৎস (গড় তরঙ্গদৈর্ঘ্য প্রায় 500 এনএম) সহ একটি পরীক্ষাগার মাইক্রোস্কোপে NA 0.95 উদ্দেশ্য ব্যবহার করার সময়, আমরা প্রায় 300 এনএম রেজোলিউশন পাই।

একটি হালকা মাইক্রোস্কোপের সার্কিট ডায়াগ্রাম থেকে দেখা যায়, আইপিস একটি বস্তুর প্রকৃত চিত্রকে বড় করে। যদি, উদাহরণস্বরূপ, আপনি আইপিসগুলির বিবর্ধন 2 গুণ বৃদ্ধি করেন (অণুবীক্ষণ যন্ত্রে 20x আইপিস ঢোকান), তাহলে সিস্টেমের মোট বিবর্ধন দ্বিগুণ হবে, তবে রেজোলিউশন একই থাকবে।

গুরুত্বপূর্ণ তথ্য

ধরা যাক যে আমাদের কাছে একটি সাধারণ পরীক্ষাগার মাইক্রোস্কোপ তৈরির জন্য দুটি বিকল্প রয়েছে। আমরা একটি 40x NA 0.65 উদ্দেশ্য এবং 10x আইপিস ব্যবহার করে প্রথমটি তৈরি করব। দ্বিতীয়টি একটি 20x NA 0.4 উদ্দেশ্য এবং 20x আইপিস ব্যবহার করবে।

উভয় সংস্করণে মাইক্রোস্কোপের বিবর্ধন একই হবে= 400x (অবজেক্টিভ এবং আইপিস ম্যাগনিফিকেশনের সরল গুণ)। এবং এখানে প্রথম সংস্করণে রেজোলিউশন বেশি হবে,দ্বিতীয়টির তুলনায়, যেহেতু 40x লেন্সের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার বড়। এছাড়াও, আইপিসগুলির দৃশ্যের ক্ষেত্রটি সম্পর্কে ভুলবেন না; 20x এর জন্য এই প্যারামিটারটি 20-25% কম।

মাইক্রোস্কোপগুলি অণুজীব সনাক্ত করতে এবং অধ্যয়ন করতে ব্যবহৃত হয়। হালকা অণুবীক্ষণ যন্ত্রগুলি এমন অণুজীব অধ্যয়নের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে যেগুলি আকারে কমপক্ষে 0.2 মাইক্রন (ব্যাকটেরিয়া, প্রোটোজোয়া, ইত্যাদি) এবং ইলেকট্রনিক মাইক্রোস্কোপগুলি ছোট অণুজীব (ভাইরাস) এবং ব্যাকটেরিয়ার ক্ষুদ্রতম গঠন অধ্যয়নের জন্য ডিজাইন করা হয়েছে।
আধুনিক হালকা মাইক্রোস্কোপ- এইগুলি জটিল অপটিক্যাল যন্ত্র, যার পরিচালনার জন্য নির্দিষ্ট জ্ঞান, দক্ষতা এবং মহান যত্ন প্রয়োজন।
হালকা অণুবীক্ষণ যন্ত্রগুলি ছাত্র, কাজ, পরীক্ষাগার এবং গবেষণায় বিভক্ত, ডিজাইন এবং অপটিক্সে ভিন্ন। গার্হস্থ্য অণুবীক্ষণ যন্ত্রের (বায়োলাম, বিমাম, মিকমেড) উপাধি রয়েছে যা নির্দেশ করে যে তারা কোন গ্রুপের (এস - ছাত্র, আর - শ্রমিক, এল - পরীক্ষাগার, আই - গবেষণা), সরঞ্জামগুলি একটি সংখ্যা দ্বারা নির্দেশিত হয়।

একটি মাইক্রোস্কোপ যান্ত্রিক এবং অপটিক্যাল অংশ আছে।
প্রতি যান্ত্রিক অংশঅন্তর্ভুক্ত: একটি ট্রাইপড (একটি বেস এবং একটি টিউব হোল্ডার সমন্বিত) এবং লেন্সগুলি সংযুক্ত এবং পরিবর্তন করার জন্য একটি রিভলভার সহ একটি টিউব, প্রস্তুতির জন্য একটি মঞ্চ, একটি কনডেন্সার এবং হালকা ফিল্টার সংযুক্ত করার জন্য ডিভাইস, সেইসাথে তৈরি মেকানিজমগুলি মোটা (ম্যাক্রোমেকানিজম, ম্যাক্রোস্ক্রু) এবং জরিমানা জন্য ট্রাইপড
(মাইক্রোমেকানিজম, মাইক্রোস্ক্রু) অবজেক্ট স্টেজ বা টিউব ধারককে সরানো।
অপটিক্যাল অংশঅণুবীক্ষণ যন্ত্রটি উদ্দেশ্য, আইপিস এবং একটি আলোক ব্যবস্থা দ্বারা উপস্থাপিত হয়, যার ফলস্বরূপ স্টেজের নীচে অবস্থিত একটি অ্যাবে কনডেনসার, একটি সমতল এবং অবতল দিক সহ একটি আয়না, সেইসাথে একটি পৃথক বা অন্তর্নির্মিত আলোকযন্ত্র থাকে। লেন্সগুলি রিভলভারে স্ক্রু করা হয় এবং সংশ্লিষ্ট আইপিস, যার মাধ্যমে চিত্রটি পর্যবেক্ষণ করা হয়, টিউবের বিপরীত দিকে ইনস্টল করা হয়। একরঙা (একটি আইপিসযুক্ত) এবং বাইনোকুলার (দুটি অভিন্ন আইপিসযুক্ত) টিউব রয়েছে।

একটি মাইক্রোস্কোপ এবং আলো ব্যবস্থার পরিকল্পিত চিত্র

1. আলোর উৎস;
2. কালেক্টর;
3. আইরিস ফিল্ড ডায়াফ্রাম;
4. আয়না;
5. আইরিস অ্যাপারচার ডায়াফ্রাম;
6. কনডেনসার;
7. ওষুধ;
7. প্রস্তুতির বর্ধিত বাস্তব মধ্যবর্তী চিত্র, দ্বারা গঠিত: লেন্স;
7"" আইপিসের মাধ্যমে দেখা নমুনার বর্ধিত ভার্চুয়াল চূড়ান্ত চিত্র;
8. লেন্স;
9. লেন্স আউটপুট আইকন;
10. আইপিসের ফিল্ড ডায়াফ্রাম;
11. আইপিস;
12. চোখ।

একটি ইমেজ প্রাপ্ত প্রধান ভূমিকা দ্বারা অভিনয় করা হয় লেন্স. এটি একটি বস্তুর একটি বর্ধিত, বাস্তব এবং উল্টানো চিত্র তৈরি করে। একটি আইপিসের মাধ্যমে দেখা হলে এই চিত্রটিকে আরও বড় করা হয়, যা একটি নিয়মিত ম্যাগনিফাইং গ্লাসের মতো, একটি বর্ধিত ভার্চুয়াল চিত্র তৈরি করে।
বৃদ্ধিএকটি মাইক্রোস্কোপের আনুমানিক বিবর্ধন আইপিসের বিবর্ধন দ্বারা উদ্দেশ্যের বিবর্ধনকে গুণ করে নির্ধারণ করা যেতে পারে। যাইহোক, ম্যাগনিফিকেশন ছবির গুণমান নির্ধারণ করে না। ছবির গুণমান, তার স্বচ্ছতা, নির্ধারিত হয় মাইক্রোস্কোপ রেজোলিউশন, অর্থাৎ, দুটি কাছাকাছি অবস্থিত বিন্দুকে আলাদাভাবে আলাদা করার ক্ষমতা। রেজোলিউশন সীমা- ন্যূনতম দূরত্ব যেখানে এই বিন্দুগুলি এখনও আলাদাভাবে দৃশ্যমান - আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্যের উপর নির্ভর করে যার সাহায্যে বস্তুটি আলোকিত হয় এবং লেন্সের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার। সাংখ্যিক ছিদ্র, ঘুরে, উদ্দেশ্যের কৌণিক ছিদ্র এবং উদ্দেশ্য এবং নমুনার সামনের লেন্সের মধ্যে অবস্থিত মাধ্যমের প্রতিসরণ সূচকের উপর নির্ভর করে। কৌণিক অ্যাপারচার হল সর্বাধিক কোণ যেখানে একটি বস্তুর মধ্য দিয়ে যাওয়া রশ্মি লেন্সে প্রবেশ করতে পারে। অ্যাপারচার যত বড় হবে এবং লেন্স এবং নমুনার মধ্যে অবস্থিত মাঝারিটির প্রতিসরণ সূচক কাচের প্রতিসরণকারী সূচকের কাছাকাছি হবে, লেন্সের সমাধান ক্ষমতা তত বেশি হবে। যদি আমরা ধরে নিই যে কনডেনসার অ্যাপারচার লেন্স অ্যাপারচারের সমান, তাহলে রেজোলিউশন সূত্রটির নিম্নলিখিত ফর্ম রয়েছে:

যেখানে R হল রেজোলিউশন সীমা; - তরঙ্গদৈর্ঘ্য; NA - সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার।

পার্থক্য করা দরকারীএবং অকেজোবৃদ্ধি. দরকারী বিবর্ধন সাধারণত 500 থেকে 1000 বার বড় করা লেন্সের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচারের সমান। উচ্চতর অকুলার ম্যাগনিফিকেশন নতুন বিবরণ প্রকাশ করে না এবং কোন কাজে আসে না।
লেন্স এবং নমুনার মধ্যবর্তী পরিবেশের উপর নির্ভর করে, ছোট এবং মাঝারি ম্যাগনিফিকেশনের "শুকনো" লেন্স (40 x পর্যন্ত) এবং সর্বাধিক অ্যাপারচার এবং ম্যাগনিফিকেশন (90-100 x) সহ নিমজ্জন লেন্স রয়েছে। একটি "শুষ্ক" লেন্স হল একটি লেন্স যার সামনের লেন্স এবং নমুনার মধ্যে বাতাস থাকে।

নিমজ্জন লেন্সগুলির একটি বৈশিষ্ট্য হল যে এই ধরনের লেন্সের সামনের লেন্স এবং প্রস্তুতির মধ্যে একটি নিমজ্জন তরল স্থাপন করা হয়, যার একটি প্রতিসরণ সূচক রয়েছে কাচের মতো (বা এটির কাছাকাছি), যা সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার বৃদ্ধি নিশ্চিত করে এবং লেন্সের রেজোলিউশন। পাতিত জল জল নিমজ্জন লেন্সের জন্য একটি নিমজ্জন তরল হিসাবে ব্যবহৃত হয়, এবং সিডার তেল বা বিশেষ সিন্থেটিক নিমজ্জন তেল তেল নিমজ্জন লেন্সের জন্য ব্যবহৃত হয়। কৃত্রিম নিমজ্জন তেল ব্যবহার করা বাঞ্ছনীয় কারণ এর পরামিতিগুলি আরও সঠিকভাবে প্রমিত, এবং সিডার তেলের বিপরীতে, এটি লেন্সের সামনের লেন্সের পৃষ্ঠে শুকিয়ে যায় না। স্পেকট্রামের অতিবেগুনী অঞ্চলে কাজ করা লেন্সগুলির জন্য, গ্লিসারিন একটি নিমজ্জন তরল হিসাবে ব্যবহৃত হয়। কোনো অবস্থাতেই নিমজ্জন তেল এবং বিশেষ করে ভ্যাসলিন তেলের বিকল্প ব্যবহার করা উচিত নয়।
**লেন্স ব্যবহার করে প্রাপ্ত চিত্রের বিভিন্ন অসুবিধা রয়েছে: গোলাকার এবং ক্রোম্যাটিক বিকৃতি, চিত্র ক্ষেত্রের বক্রতা ইত্যাদি। বেশ কয়েকটি লেন্সের সমন্বয়ে গঠিত লেন্সগুলিতে, এই ত্রুটিগুলি এক বা অন্য ডিগ্রীতে সংশোধন করা হয়। এই ত্রুটিগুলির সংশোধনের মাত্রার উপর নির্ভর করে, অ্যাক্রোম্যাট লেন্সগুলিকে আরও জটিল অ্যাপোক্রোম্যাট লেন্স থেকে আলাদা করা হয়। তদনুসারে, যে লেন্সগুলিতে চিত্র ক্ষেত্রের বক্রতা সংশোধন করা হয় সেগুলিকে প্ল্যানক্রোম্যাট এবং প্ল্যানপোক্রোম্যাট বলা হয়। এই লেন্সগুলি ব্যবহার করে দৃশ্যের পুরো ক্ষেত্র জুড়ে একটি তীক্ষ্ণ চিত্র তৈরি করে, যেখানে প্রচলিত লেন্সগুলির সাহায্যে প্রাপ্ত চিত্রটি কেন্দ্রে এবং দৃশ্যের ক্ষেত্রের প্রান্তে সমানভাবে তীক্ষ্ণ নয়। লেন্সের সমস্ত বৈশিষ্ট্য সাধারণত এর ফ্রেমে খোদাই করা হয়: এর নিজস্ব ম্যাগনিফিকেশন, অ্যাপারচার, লেন্সের ধরন (APO - apochromat, ইত্যাদি); জল নিমজ্জন লেন্সের উপাধি VI এবং নীচের অংশে ফ্রেমের চারপাশে একটি সাদা রিং থাকে, তেল নিমজ্জন লেন্সের উপাধি MI এবং একটি কালো রিং থাকে।
সমস্ত উদ্দেশ্য কভার গ্লাস 0.17 মিমি পুরু সঙ্গে কাজ করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে.
শক্তিশালী শুকনো সিস্টেমের সাথে কাজ করার সময় কভারস্লিপের বেধ বিশেষ করে ছবির গুণমানকে প্রভাবিত করে (40 x)। নিমজ্জন উদ্দেশ্য নিয়ে কাজ করার সময়, আপনি 0.17 মিমি এর বেশি পুরু কভার স্লিপ ব্যবহার করতে পারবেন না কারণ কভার স্লিপের পুরুত্ব উদ্দেশ্যটির কাজের দূরত্বের চেয়ে বেশি হতে পারে এবং এই ক্ষেত্রে, নমুনার উপর উদ্দেশ্য ফোকাস করার চেষ্টা করার সময়, সামনে উদ্দেশ্য লেন্স ক্ষতিগ্রস্ত হতে পারে.
Eyepieces দুটি লেন্স নিয়ে গঠিত এবং এছাড়াও বিভিন্ন ধরনের আসে, যার প্রতিটি একটি নির্দিষ্ট ধরনের লেন্সের সাথে ব্যবহার করা হয়, আরও ইমেজ অসম্পূর্ণতা দূর করে। আইপিস টাইপ এবং ম্যাগনিফিকেশন ফ্রেমে চিহ্নিত করা হয়েছে।
কনডেন্সারটি অনুবীক্ষণ যন্ত্র বা ইলুমিনেটরের আয়না (ওভারহেড বা বিল্ট-ইন ইলুমিনেটর ব্যবহার করার ক্ষেত্রে) দ্বারা নির্দেশিত নমুনার উপর আলোকসজ্জার আলো ফোকাস করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে। কনডেনসারের একটি অংশ হল অ্যাপারচার ডায়াফ্রাম, যা ওষুধের সঠিক আলোকসজ্জার জন্য গুরুত্বপূর্ণ।
ইলুমিনেটরটিতে একটি পুরু ফিলামেন্ট, একটি ট্রান্সফরমার, একটি সংগ্রাহক লেন্স এবং একটি ফিল্ড ডায়াফ্রাম সহ একটি কম-ভোল্টেজের ভাস্বর বাতি থাকে, যার খোলার প্রস্তুতিতে আলোকিত ক্ষেত্রের ব্যাস নির্ধারণ করে। আয়না ইলুমিনেটর থেকে কনডেনসারে আলোকে নির্দেশ করে। ইলুমিনেটর থেকে কনডেন্সারে আসা রশ্মির সমান্তরালতা বজায় রাখার জন্য, আয়নার শুধুমাত্র সমতল দিক ব্যবহার করা প্রয়োজন।

আলো স্থাপন করা এবং মাইক্রোস্কোপ ফোকাস করা

ছবির গুণমানও মূলত সঠিক আলোর উপর নির্ভর করে। মাইক্রোস্কোপির জন্য একটি নমুনা আলোকিত করার বিভিন্ন উপায় রয়েছে। সবচেয়ে সাধারণ উপায় হল Köhler আলো ইনস্টলেশনযা নিম্নরূপ:
1) মাইক্রোস্কোপ আয়নার বিরুদ্ধে ইলুমিনেটর ইনস্টল করুন;
2) ইলুমিনেটর বাতিটি চালু করুন এবং মাইক্রোস্কোপের সমতল (!) আয়নার দিকে আলোকে নির্দেশ করুন;
3) মাইক্রোস্কোপ পর্যায়ে প্রস্তুতি রাখুন;
4) মাইক্রোস্কোপ আয়নাটিকে সাদা কাগজের একটি টুকরো দিয়ে ঢেকে দিন এবং এটিতে ল্যাম্প ফিলামেন্টের চিত্রটি ফোকাস করুন, আলোকযন্ত্রে ল্যাম্প সকেটটি সরান;
5) আয়না থেকে কাগজের শীট সরান;
6) কনডেন্সারের অ্যাপারচার ডায়াফ্রাম বন্ধ করুন। আয়নাটি সরানো এবং বাতির সকেটটি সামান্য সরানোর মাধ্যমে, ফিলামেন্টের চিত্রটি অ্যাপারচার ডায়াফ্রামের উপর ফোকাস করা হয়। মাইক্রোস্কোপ থেকে ইলুমিনেটরের দূরত্ব এমন হওয়া উচিত যাতে ল্যাম্প ফিলামেন্টের চিত্রটি কনডেনসারের অ্যাপারচার ডায়াফ্রামের ব্যাসের সমান হয় (অ্যাপারচার ডায়াফ্রামটি বেসের ডানদিকে স্থাপিত একটি সমতল আয়না ব্যবহার করে পর্যবেক্ষণ করা যেতে পারে। মাইক্রোস্কোপ)।
7) কনডেন্সারের অ্যাপারচার ডায়াফ্রাম খুলুন, আলোকযন্ত্রের ফিল্ড ডায়াফ্রামের খোলার হ্রাস করুন এবং বাতির তীব্রতা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করুন;
8) কম বিবর্ধনে (10x), আইপিসের মধ্য দিয়ে তাকালে, প্রস্তুতির একটি তীক্ষ্ণ চিত্র পাওয়া যায়;
9) আয়নাটি সামান্য ঘুরিয়ে, ফিল্ড ডায়াফ্রামের চিত্র, যা একটি উজ্জ্বল দাগের মতো দেখায়, দৃশ্যের ক্ষেত্রের কেন্দ্রে স্থানান্তরিত হয়। কনডেন্সারকে নামিয়ে ও উত্থাপন করে, কেউ প্রস্তুতির সমতলে ফিল্ড ডায়াফ্রামের প্রান্তগুলির একটি তীক্ষ্ণ চিত্র অর্জন করে (তাদের চারপাশে একটি রঙিন সীমানা দৃশ্যমান হতে পারে);
10) ইলুমিনেটরের ফিল্ড ডায়াফ্রামটি দৃশ্যের ক্ষেত্রের প্রান্তে খুলুন, বাতির ফিলামেন্টের তীব্রতা বাড়ান এবং সামান্য (1/3 দ্বারা) কনডেনসার অ্যাপারচার ডায়াফ্রামের খোলার হ্রাস করুন;
11) লেন্স পরিবর্তন করার সময়, আপনাকে আলোর সেটিংস পরীক্ষা করতে হবে।
Köhler আলো সমন্বয় সম্পন্ন করার পরে, আপনি কনডেন্সারের অবস্থান এবং ক্ষেত্র এবং অ্যাপারচার ডায়াফ্রামের খোলার পরিবর্তন করতে পারবেন না। ওষুধের আলোকসজ্জা শুধুমাত্র নিরপেক্ষ ফিল্টার দিয়ে বা রিওস্ট্যাট ব্যবহার করে বাতির তীব্রতা পরিবর্তন করে সামঞ্জস্য করা যেতে পারে। কনডেনসার অ্যাপারচার ডায়াফ্রামের অত্যধিক খোলার ফলে চিত্রের বৈসাদৃশ্যে উল্লেখযোগ্য হ্রাস হতে পারে এবং অপর্যাপ্ত খোলার ফলে চিত্রের গুণমানে উল্লেখযোগ্য অবনতি ঘটতে পারে (ডিফ্র্যাকশন রিংগুলির উপস্থিতি)। অ্যাপারচার ডায়াফ্রামের সঠিক খোলার পরীক্ষা করার জন্য, আইপিসটি অপসারণ করা প্রয়োজন এবং, টিউবের দিকে তাকিয়ে এটি খুলুন যাতে এটি উজ্জ্বল ক্ষেত্রটিকে এক তৃতীয়াংশ দ্বারা আবৃত করে। লো ম্যাগনিফিকেশন লেন্স (10x পর্যন্ত) দিয়ে কাজ করার সময় নমুনাটিকে সঠিকভাবে আলোকিত করতে, উপরের কনডেনসার লেন্সটি খুলে ফেলা এবং অপসারণ করা প্রয়োজন।
মনোযোগ! শক্তিশালী শুষ্ক (40x) এবং নিমজ্জন (90x) সিস্টেম সহ উচ্চ বিস্তৃতি প্রদানকারী লেন্সগুলির সাথে কাজ করার সময়, সামনের লেন্সের ক্ষতি না করার জন্য, ফোকাস করার সময়, নিম্নলিখিত কৌশলটি ব্যবহার করুন: পাশ থেকে তাকান, একটি ম্যাক্রো দিয়ে লেন্সটি নিচু করুন প্রায় স্ক্রু করুন যতক্ষণ না এটি নমুনার সংস্পর্শে আসে, তারপরে, আইপিসের দিকে তাকিয়ে, একটি ম্যাক্রোস্ক্রু ব্যবহার করে, খুব ধীরে ধীরে লেন্স বাড়ান যতক্ষণ না একটি চিত্র প্রদর্শিত হয় এবং একটি মাইক্রোস্ক্রু ব্যবহার করে, মাইক্রোস্কোপের চূড়ান্ত ফোকাসিং সঞ্চালিত হয়।

মাইক্রোস্কোপ যত্ন

একটি মাইক্রোস্কোপ সঙ্গে কাজ করার সময়, মহান বল ব্যবহার করবেন না. আপনার আঙ্গুল দিয়ে লেন্স, আয়না এবং ফিল্টার পৃষ্ঠ স্পর্শ করবেন না.
লেন্সের অভ্যন্তরীণ পৃষ্ঠগুলি, সেইসাথে টিউবের প্রিজমগুলিকে ধুলো থেকে রক্ষা করতে, আপনাকে অবশ্যই টিউবের মধ্যে আইপিসটি সর্বদা ছেড়ে দিতে হবে। লেন্সগুলির বাহ্যিক পৃষ্ঠগুলি পরিষ্কার করার সময়, আপনাকে ইথারে ধুয়ে একটি নরম ব্রাশ দিয়ে সেগুলি থেকে ধুলো অপসারণ করতে হবে। প্রয়োজনে, ভালভাবে ধোয়া, সাবান-মুক্ত লিনেন বা ক্যামব্রিক কাপড় দিয়ে লেন্সের পৃষ্ঠগুলি সাবধানে মুছুন, বিশুদ্ধ পেট্রল, ইথার বা অপটিক্স পরিষ্কারের জন্য একটি বিশেষ মিশ্রণ দিয়ে হালকাভাবে আর্দ্র করুন। জাইলিন দিয়ে লেন্স অপটিক্স মোছার পরামর্শ দেওয়া হয় না, কারণ এটি তাদের আলাদা হতে পারে।
বাহ্যিক সিলভারিং সহ আয়না থেকে, আপনি কেবল রাবার বাল্ব দিয়ে এটিকে উড়িয়ে দিয়ে ধুলো অপসারণ করতে পারেন। তাদের মুছা যাবে না। আপনি নিজেও লেন্সগুলি খুলতে বা বিচ্ছিন্ন করতে পারবেন না - এটি তাদের ক্ষতির দিকে নিয়ে যাবে। অণুবীক্ষণ যন্ত্রের কাজ শেষ হওয়ার পরে, উপরে নির্দেশিত পদ্ধতি ব্যবহার করে সামনের উদ্দেশ্য লেন্স থেকে অবশিষ্ট নিমজ্জন তেল সাবধানে অপসারণ করা প্রয়োজন। তারপর স্টেজ (অথবা একটি নির্দিষ্ট পর্যায় সহ অণুবীক্ষণ যন্ত্রে কনডেন্সার) নামিয়ে নিন এবং একটি কভার দিয়ে মাইক্রোস্কোপটি ঢেকে দিন।
অণুবীক্ষণ যন্ত্রের চেহারা বজায় রাখার জন্য, এটিকে পর্যায়ক্রমে একটি নরম কাপড় দিয়ে হালকাভাবে অ্যাসিড-মুক্ত ভ্যাসলিন ভিজিয়ে এবং তারপর একটি শুকনো, নরম, পরিষ্কার কাপড় দিয়ে মুছতে হবে।

প্রচলিত হালকা মাইক্রোস্কোপি ছাড়াও, এমন মাইক্রোস্কোপি পদ্ধতি রয়েছে যা দাগহীন অণুজীবের অধ্যয়নের অনুমতি দেয়: ফেজ কনট্রাস্ট , অন্ধকার-ক্ষেত্রএবং আলোকিতমাইক্রোস্কোপি অণুজীব এবং তাদের গঠন অধ্যয়ন করতে, যার আকার হালকা মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশনের চেয়ে কম, ব্যবহার করুন

ছবির মাননির্ধারিত মাইক্রোস্কোপ রেজোলিউশন, অর্থাৎ ন্যূনতম দূরত্ব যেখানে একটি অণুবীক্ষণ যন্ত্রের আলোকবিদ্যা দুটি ঘনিষ্ঠ দূরত্বের বিন্দুকে আলাদাভাবে আলাদা করতে পারে। রেজোলিউশন উদ্দেশ্য, কনডেনসার এবং নমুনাকে আলোকিত করে এমন আলোর তরঙ্গদৈর্ঘ্যের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচারের উপর নির্ভর করে। সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার (খোলা) উদ্দেশ্য এবং কনডেনসার এবং নমুনার সামনের লেন্সের মধ্যে অবস্থিত মাধ্যমের কৌণিক অ্যাপারচার এবং প্রতিসরণ সূচকের উপর নির্ভর করে।

লেন্স কৌণিক অ্যাপারচার- এটি হল সর্বোচ্চ কোণ (AOB) যেখানে প্রস্তুতির মধ্য দিয়ে যাওয়া রশ্মি লেন্সে প্রবেশ করতে পারে। লেন্স সংখ্যাসূচক অ্যাপারচারঅর্ধেক কৌণিক অ্যাপারচারের সাইনের গুণফল এবং গ্লাস স্লাইড এবং অবজেক্টিভ লেন্সের সামনের লেন্সের মধ্যে অবস্থিত মাধ্যমের প্রতিসরণ সূচকের সমান। N.A. = n sinα যেখানে, N.A. - সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার; n হল নমুনা এবং লেন্সের মধ্যবর্তী মাধ্যমটির প্রতিসরণকারী সূচক; sinα হল ডায়াগ্রামে AOB কোণের অর্ধেক কোণ α এর সাইন।

সুতরাং, শুষ্ক সিস্টেমের অ্যাপারচার (সামনের উদ্দেশ্য লেন্স এবং বায়ু প্রস্তুতির মধ্যে) 1 এর বেশি হতে পারে না (সাধারণত 0.95 এর বেশি নয়)। নমুনা এবং উদ্দেশ্যের মধ্যে যে মাধ্যমটি স্থাপন করা হয় তাকে নিমজ্জন তরল বা নিমজ্জন বলা হয় এবং নিমজ্জন তরলের সাথে কাজ করার জন্য ডিজাইন করা একটি উদ্দেশ্যকে নিমজ্জন বলা হয়। বাতাসের তুলনায় উচ্চ প্রতিসরাঙ্ক সূচকের সাথে নিমজ্জনের জন্য ধন্যবাদ, লেন্সের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার এবং তাই রেজোলিউশন বৃদ্ধি করা সম্ভব।

লেন্সের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার সবসময় তাদের ফ্রেমে খোদাই করা থাকে।
মাইক্রোস্কোপের রেজোলিউশন কনডেন্সারের অ্যাপারচারের উপরও নির্ভর করে। যদি আমরা কনডেনসার অ্যাপারচারকে লেন্স অ্যাপারচারের সমান বলে বিবেচনা করি, তাহলে রেজোলিউশন সূত্রটির ফর্ম R=λ/2NA থাকে, যেখানে R হল রেজোলিউশন সীমা; λ - তরঙ্গদৈর্ঘ্য; N.A - সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার। এই সূত্র থেকে এটা স্পষ্ট যে দৃশ্যমান আলোতে দেখা হলে (বর্ণালীর সবুজ অংশ - λ = 550 nm), রেজোলিউশন (রেজোলিউশন সীমা) > 0.2 µm হতে পারে না

চিত্রের মানের উপর মাইক্রোস্কোপের উদ্দেশ্যের সংখ্যাসূচক অ্যাপারচারের প্রভাব

অপটিক্যাল রেজোলিউশন বাড়ানোর উপায়

লেন্সের দিক থেকে এবং আলোর উত্সের দিক থেকে উভয়ই একটি বড় হালকা শঙ্কু কোণ নির্বাচন করা। এর জন্য ধন্যবাদ, লেন্সের খুব পাতলা কাঠামো থেকে আলোর আরও প্রতিসৃত রশ্মি সংগ্রহ করা সম্ভব। সুতরাং, রেজোলিউশন বাড়ানোর প্রথম উপায় হল একটি কনডেন্সার ব্যবহার করা যার সংখ্যাসূচক অ্যাপারচার উদ্দেশ্যটির সংখ্যাসূচক অ্যাপারচারের সাথে মেলে।

দ্বিতীয় পদ্ধতি হল সামনের অবজেক্টিভ লেন্স এবং কভার গ্লাসের মধ্যে নিমজ্জন তরল ব্যবহার করা। এইভাবে আমরা প্রথম সূত্রে বর্ণিত মাধ্যম n-এর প্রতিসরণ সূচককে প্রভাবিত করি। নিমজ্জন তরল জন্য প্রস্তাবিত এর সর্বোত্তম মান হল 1.51।

নিমজ্জন তরল

নিমজ্জন তরলসংখ্যাসূচক অ্যাপারচার বাড়ানোর জন্য প্রয়োজনীয় এবং সেই অনুযায়ী, নিমজ্জন উদ্দেশ্যগুলির রেজোলিউশন বাড়ানোর জন্য, বিশেষভাবে এই তরলগুলির সাথে কাজ করার জন্য ডিজাইন করা হয়েছে এবং সেই অনুযায়ী চিহ্নিত করা হয়েছে। উদ্দেশ্য এবং নমুনার মধ্যে স্থাপন করা নিমজ্জন তরল বাতাসের তুলনায় একটি উচ্চ প্রতিসরণ সূচক আছে। অতএব, বস্তুর ক্ষুদ্রতম বিশদ দ্বারা বিচ্যুত আলোক রশ্মি প্রস্তুতি ছেড়ে লেন্সে প্রবেশ করার সময় বিক্ষিপ্ত হয় না, যা রেজোলিউশন বৃদ্ধির দিকে পরিচালিত করে।

জল নিমজ্জন লেন্স (একটি সাদা রিং দ্বারা চিহ্নিত), তেল নিমজ্জন লেন্স (কালো রিং), গ্লিসারিন নিমজ্জন লেন্স (হলুদ রিং), এবং মনোব্রোমোনাফথালিন নিমজ্জন লেন্স (লাল রিং) রয়েছে। জৈবিক প্রস্তুতির হালকা মাইক্রোস্কোপিতে, জল এবং তেল নিমজ্জনের উদ্দেশ্য ব্যবহার করা হয়। বিশেষ কোয়ার্টজ গ্লিসারল নিমজ্জন উদ্দেশ্য স্বল্প-তরঙ্গ অতিবেগুনী বিকিরণ প্রেরণ করে এবং অতিবেগুনী (ফ্লুরোসেন্টের সাথে বিভ্রান্ত না হওয়া) মাইক্রোস্কোপির জন্য ডিজাইন করা হয়েছে (অর্থাৎ, জৈবিক বস্তু অধ্যয়নের জন্য যা বেছে বেছে অতিবেগুনী রশ্মি শোষণ করে)। জৈবিক বস্তুর মাইক্রোস্কোপিতে মনোব্রোমিনেটেড ন্যাপথলিন নিমজ্জন উদ্দেশ্য ব্যবহার করা হয় না।

পাতিত জল একটি জল নিমজ্জন লেন্সের জন্য একটি নিমজ্জন তরল হিসাবে ব্যবহৃত হয়, এবং একটি নির্দিষ্ট প্রতিসরণ সূচক সহ প্রাকৃতিক (সিডার) বা কৃত্রিম তেল একটি তেল নিমজ্জন লেন্সের জন্য একটি নিমজ্জন তরল হিসাবে ব্যবহৃত হয়।

অন্যান্য নিমজ্জন তরল থেকে ভিন্ন তেল নিমজ্জনএটি সমজাতীয় কারণ এর একটি প্রতিসরণ সূচক রয়েছে কাচের প্রতিসরণ সূচকের সমান বা খুব কাছাকাছি। সাধারণত এই প্রতিসরণ সূচক (n) একটি নির্দিষ্ট বর্ণালী রেখা এবং একটি নির্দিষ্ট তাপমাত্রার জন্য গণনা করা হয় এবং তেলের বোতলের উপর নির্দেশিত হয়। উদাহরণস্বরূপ, সোডিয়াম স্পেকট্রামে = 20°C তাপমাত্রায় বর্ণালী রেখা D-এর জন্য একটি কভার গ্লাসের সাথে কাজ করার জন্য নিমজ্জন তেলের প্রতিসরণ সূচক হল 1.515 (nD 20 = 1.515), একটি কভার গ্লাস ছাড়া কাজ করার জন্য (nD 20 = 1.520) )

অপক্রোমাটিক লেন্সগুলির সাথে কাজ করার জন্য, বিচ্ছুরণও স্বাভাবিক করা হয়, অর্থাৎ, বর্ণালীর বিভিন্ন রেখার জন্য প্রতিসরাঙ্ক সূচকের পার্থক্য।

কৃত্রিম নিমজ্জন তেল ব্যবহার করা বাঞ্ছনীয় কারণ এর পরামিতিগুলি আরও সঠিকভাবে প্রমিত, এবং সিডার তেলের বিপরীতে, এটি লেন্সের সামনের লেন্সের পৃষ্ঠে শুকিয়ে যায় না।

উপরোক্ত বিবেচনা করে, কোন অবস্থাতেই নিমজ্জন তেল এবং বিশেষ করে ভ্যাসলিন তেলের জন্য সারোগেট ব্যবহার করা উচিত নয়। কিছু মাইক্রোস্কোপি পদ্ধতিতে, কনডেন্সারের অ্যাপারচার বাড়ানোর জন্য, কনডেন্সার এবং নমুনার মধ্যে একটি নিমজ্জন তরল (সাধারণত পাতিত জল) স্থাপন করা হয়।